《捉个女帝当娇妻》免费试读
1.核酸的种类与功能核酸的种类：根据提取的来源不同，可以分为胸腺核酸和酵母核酸，即DNA和RNA。
DNA是主要的遗传物质。
RNA的生物学功能：
①遗传物质：在RNA病毒中，RNA是遗传物质，起着携带遗传信息的功能。
②参与蛋白质合成：mRNA是蛋白质合成的模板，其核苷酸序列决定蛋白质的氨基酸序列，rRNA与蛋白质结合形成核糖体，是蛋白质合成的场所，tRNA起着携带和转移氨基酸的作用。
③核内小RNA（snRNA）：与蛋白质组成复合物，参与mrna前体的加工及mrna由核到细胞质的运送。
④核仁小RNA（snoRNA）：参与rRNA前体的加工及核糖体亚基的装配。
⑤催化性小RNA（核酶）：参与RNA自身的剪接、加工。
⑥miRNA和siRNA：靶向一个或者多个mRNA，断裂靶标mRNA而调节基因的表达。
2.核酸的分子结构特点
①核酸的一级结构：构成核酸的多聚核苷酸链中的所有核苷酸或碱基的排列顺序。每一条线性多聚核苷酸都具有极性，有5C‘和3C‘。
②DNA的二级结构：主要为各种形式的螺旋结构，最常见的是B型双螺旋，此外还有A型双螺旋，Z型双螺旋，三股螺旋和四股螺旋等。
稳定双螺旋结构的因素有氢键、碱基堆积力和离子键，其中，起决定性作用的是碱基堆积力。
③DNA的三级结构：主要为超螺旋分为正超螺旋和负超螺旋，天然DNA多数处于欠旋状态，以负超螺旋形式存在。
④RNA的二级结构和三级结构：RNA只有一条链，其二级结构主要由链内碱基的互补特性决定，大多数是茎环结构。其中tRNA的二级结构像三叶草，含有4个环和4个臂。tRNA的三级结构是倒“L”形结构。
3.核酸的重要理化性质
①两性性质及等电点：核酸分子中既含有酸性的磷酸基团也含有弱碱性的碱基，因而核酸是两性电解质。核酸的解离状态与溶液的pH有关，当核酸溶液的pH处于核酸的pI时，净电荷为零。在中性或偏碱性缓冲液中，核酸解离成阴离子，在电场中向阳极移动。
②紫外吸收性质：由于碱基具有共轭双键体系，在260纳米有最大的光吸收能力，可用来鉴定核酸样品的纯度及进行核酸的定量测定。
③核酸的变性与复性：核酸在某些理化因素的影响下，其双螺旋解链成单链的过程即核酸的变性。核酸变性过程常伴随一系列物理化学性质的变化，包括黏度降低、浮力密度上升、沉降速度增加、增色效应。
变性的DNA在适宜条件下，两条彼此分开的互补单链，重新形成双螺旋结构的现象，称为复性。
热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性，此过程被称为退火。
核酸变性与复性的应用——分子杂交：在退火条件下，不同来源的DNA互补区形成双链或DNA和RNA链的互补区形成DNA-RNA杂合双链的技术叫做核酸杂交。
杂交是分子生物学研究中常用的技术之一，其中不同来源的变性DNA之间的杂交称为Southern印迹，变性DNA与RNA之间的杂交称为Northern印迹。
4.核蛋白的结构
普遍存在于各种生物的细胞核中的特殊形态的蛋白质，由核酸与组蛋白、精蛋白等的碱性蛋白结合而成为细胞核的主要成分。
各种核糖体尽管大小差异很大，但它们的核心结构非常相似。大部分rRNA高度组织成各种三级结构基序。较大核糖体中额外的RNA都是以几个长的连续插入形式出现，使得它们在核心结构中形成环而不被破坏或改变。核糖体的所有催化活性均由RNA进行，其表面的蛋白质可以稳定rRNA结构。
5.核酸的分离纯化、定量测定及常用的分析技术
核酸分离纯化的一般步骤：
①破碎细胞：将细胞破碎，使核酸释放出来。
②核蛋白的提取，细胞内核酸与蛋白质结合成核蛋白，在细胞破碎后需要先将核蛋白从细胞内的生理环境中转入外界特定的提取溶液中。DNA的提取通常选用CTAB溶液（2% CTAB, 1.4mol，20mmol，100mmol Tris-HCl PH8.0，0.2%巯基乙醇。）蛋白质的去除，利用氯仿作为变性剂去除蛋白质。
③核酸的沉淀：核酸是水溶性的，多聚阴离子及钠盐和钾盐在多数有机溶剂中是不溶的，也不会被有机溶剂变性，因此可利用无水乙醇或异丙醇沉淀核酸。
④其他杂质的去除：利用70%乙醇去除岩离子有机溶剂等杂质。
⑤核酸纯度鉴定：DNA纯度鉴定，纯的DNA样品A260280应为1.8，A260230应大于2.0。RNA纯度鉴定，纯的RNA样品A260280应为2.0。
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